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ELISA試劑盒加樣不準確?這幾個技巧幫你解決

發布時間:2025-01-16     發布作者:上海通蔚生物

  當拿到ELISA試劑盒,在開始做實驗之前,正確的加樣可以確保實驗結果準確性。在ELISA常規實驗中,實驗涉及加樣標準品/樣本、加酶結合物、加底物和終止反應等。在進行ELISA試劑盒加樣怎樣確保實驗準確性?

 

  正確加樣步驟

 

  在加樣中,一般使用的是微量加樣器(移液器,移液器)。按照試劑盒說明書,將規定量的液體加入酶標板。在每次加入新液體組分前,需要更換新的吸頭,以免液體組分發生交叉污染。也可以用一次性的定量塑料管加樣。


 微量加樣器步驟


  部分加樣步驟需要需要使用稀釋后液體組分,如標準品(凍干粉形式),需要先用一定量的稀釋液(通常是試劑盒提供的復溶液或指定的緩沖液)復溶,使其溶解成一定濃度的儲備液。然后再將這個儲備液按照一定的倍比進行稀釋,配制成一系列不同濃度的標準品溶液,用于后續實驗的上樣(即加到酶標板的孔中)。

 

  需要將濃縮的抗體和酶結合物用合適的稀釋液稀釋成1×工作液(即可以直接使用的濃度),才能加到酶標板的孔中。

 

  加抗體、酶結合物工作液和底物工作液時,可用定量多道加液器,節省加樣時間和操作,更好的確保孔與孔之間平行,減少因操作帶來的誤差。


微量加樣器

 

  在進行ELISA試劑盒加樣中,一般需要進行"45"加樣。即加樣槍的吸頭所在的直線應當與板條所在的直線呈45度角,吸頭貼著孔壁加入。

 

  在吸取樣品時,槍頭不應黏附多余的液體;加樣時不可90度向孔中滴加液體,這樣會導致液體殘留在吸頭上,導致加樣準確性降低。

 

  吸頭所在的直線與板條所在直線所呈角度不要過小,過小會使殘留的液體殘留才酶標板孔內,導致加樣準確性降低。

 

  不要將吸頭深入孔底,深入孔底可能會壓彎吸頭,另一方面吸頭深入孔底會產生氣泡,導致加樣準確性降低。

 

  上述是通蔚為大家介紹elisa試劑盒加樣怎么確保實驗準確性”相關問題解答。以上是加樣tips的全部內容,你都明白嗎?如果還有不明白,歡迎前來咨詢我們了解更多ELISA實驗操作方面技術。

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