試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從160ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至8ng/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的8ng/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將8ng/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為: 8ng/mL、 4ng/mL、 2ng/mL、 1ng/mL、 0.5ng/mL、 0.25ng/mL、 0.125ng/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0ng/mL)。

抗體工作液配置
使用前10分鐘,將100×SA-HRP溶液于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×SA-HRP稀釋成1×SA-HRP工作液,根據所需用量配置。
標準品濃度(ng/mL) |
8 |
4 |
2 |
1 |
0.5 |
0.25 |
0.125 |
0 |
OD值 |
2.593 |
1.776 |
1.073 |
0.655 |
0.389 |
0.213 |
0.156 |
0.078 |
校正OD值 |
2.515 |
1.698 |
0.995 |
0.577 |
0.311 |
0.135 |
0.078 |
0 |
下圖所示標準曲線僅供示例,結果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結果
重復性