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HK-2人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱(chēng) ：人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) ：H K-2
細(xì)胞別稱(chēng) ：H k-2;H K2;HumanKid n ey-2
細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 ：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ：M EM （含N EA A ）(PM 150410)＋10% F B S(164210-50)＋1%P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 ：2~ 3分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:2-1:4
細(xì)胞背景描述
H K -2細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞，通過(guò)導(dǎo)入H PV -16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有H PV -16 E6/E7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLX SN 16 E6/E7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-2；P si-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA 317，最后將PA 317細(xì)胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G 418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH 分析顯示，H K -2細(xì)胞來(lái)源于單克隆。PC R 檢測(cè)證實(shí)，H K -2細(xì)胞基因組中含有E 6/E 7基因。
供體年齡 ：成年
組織來(lái)源 ：腎，皮質(zhì)/近端小管
細(xì)胞類(lèi)型 ：轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
受體表達(dá) ：epiderm algrow th factor(EG F),exp ressed
基因表達(dá) ：alkaline phosphatase;gam m aglutam yltran sp ep tid ase;leu cineaminopeptid ase;acid phosphatase;cyto k eratin;alpha 3,beta 1in tegrin;fibron ectin
生物安全等級(jí) ：2
細(xì)胞保藏中心 ：ATCC ; C RL-2190 BC RC ; 60097
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異?；蛘邔?duì)細(xì)胞有疑問(wèn)，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)。可跟我們的技術(shù)支持交流。
