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產品中心

  • 人骨骼肌成纖維細胞

    規格:
    價格:
    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW33550
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 貨期 : 現貨
    • 規格 :5×10?Cells
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產品簡介
產品名稱 : 人骨骼肌成纖維細胞
產品品牌 : 通蔚生物
組織來源 : 骨骼肌組織
產品規格 : 5×105cells/T 25細胞培養瓶

細胞簡介
人骨骼肌成纖維細胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40% 。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態、結構和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經支配下收縮或舒張,進行隨意運動。

肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。

暗帶中間有一條較明亮的線稱H 線。H 線的中部有一M 線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區段,叫做一個肌節。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方,細胞多呈梭行,具有一定的方向性。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的人骨骼肌成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶 。

質量檢測
通蔚生物實驗室分離的人骨骼肌成纖維細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息
培 養  基 : 含FBS、bFG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態 : 成纖維細胞樣 
傳代特性 : 可傳3-5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%
人骨骼肌成纖維細胞體外培養周期有限;建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片

使用方法
人骨骼肌成纖維細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣,在通蔚生物技術部標準操作流程下,細胞可傳3-5代左右;3代以內狀態最佳;建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
2.貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗;包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1m g/m l),明膠(0.1% ),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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